Uno es similar al papel de prueba de oro coloidal que se usa comúnmente en las pruebas del virus de la influenza.
El papel de prueba de oro coloidal, de hecho, es usar una forma coloidal de oro para marcar biomacromoléculas y fijarlo en el papel de prueba de PVC, dejar un orificio de muestra, establecer una línea de detección y una línea de control de calidad, de modo que la muestra se agregue al orificio de muestra. Después de eso, agregue unas gotas de medio líquido y deje que el líquido fluya a la almohadilla absorbente en el otro extremo del papel de prueba. La cromatografía se realiza en el papel de prueba, generalmente durante 10 a 15 minutos. Después de que se produce la reacción inmune en el papel de prueba, puede ver la agregación de oro coloidal. ¿Hay una banda roja en la posición que es visible a simple vista, para que sepa el resultado de la prueba?
Actualmente, se han publicado y reportado dos tipos de tiras reactivas de oro coloidal sobre el nuevo coronavirus. Una detecta el antígeno del nuevo coronavirus.
Este método utiliza el método de doble sándwich de anticuerpos, es decir, para el mismo antígeno, hay dos anticuerpos en el papel de prueba, pero en diferentes posiciones. El anticuerpo marcado con oro coloidal es uno de los anticuerpos contra el antígeno, presente en la almohadilla de unión del papel de prueba.
Por ejemplo, se vierten muestras de garganta, nasales y de líquido de lavado alveolar en el orificio de la muestra, y luego se vierten unas gotas de medio fluido. Si la muestra clínica contiene un antígeno viral específico, este se unirá al oro de la almohadilla. Al ser reconocido por el anticuerpo diana, se forma un complejo antígeno-anticuerpo. En este momento, el flujo continúa hacia la almohadilla absorbente. En la línea de detección, hay otro anticuerpo contra el antígeno. El epítopo reconocido por este anticuerpo es diferente del anticuerpo marcado con oro, por lo que el mismo antígeno puede verse afectado simultáneamente por estos dos anticuerpos. Identificado. En este momento, una parte del anticuerpo marcado con oro quedará atrapada en la línea de detección, de modo que se desarrolle el color en dicha línea.
Por supuesto, la cantidad de anticuerpos marcados con oro es definitivamente excedente, por lo que no solo se interceptará en la línea de detección, sino que continuará fluyendo hacia la almohadilla absorbente. En este punto, se encuentra una línea de control de calidad. En esta línea, se encuentran anticuerpos dirigidos específicamente contra los anticuerpos marcados con oro (es decir, anti-anticuerpo, que es esencialmente un anticuerpo, pero el antígeno que reconoce también es un anticuerpo). Debido a la gran capacidad de la línea de control de calidad para reconocer anticuerpos marcados con oro, esta línea mostrará color. Este también es el principio del control de calidad. Si esta línea no muestra color, el resultado de la prueba no es válido.
Por lo tanto, el juicio de negativo y positivo es muy simple, ambas líneas están coloreadas como positivas; solo la línea de control de calidad está coloreada como negativa; otros casos aparte de estos son experimentos no válidos.
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Prueba de antígeno COVID de oro coloidal
Se puede utilizar para la detección temprana de infecciones y es un complemento eficaz para la detección de ácidos nucleicos (PCR).
El método anterior es el método de doble sándwich de anticuerpos para detectar antígenos, y el otro es para detectar anticuerpos IgM específicos del nuevo coronavirus en la sangre del paciente. Este es el papel de prueba de oro coloidal para el método de captura de IgM.
En primer lugar, debemos comprender la ley de respuesta de los anticuerpos humanos.
Cuando el cuerpo humano se expone a antígenos extraños, el primer anticuerpo que se produce es la IgM (Ig significa inmunoglobulina), pero también debe realizarse aproximadamente una semana después de la exposición al estímulo patógeno, por lo que, en cuanto a la ventana temporal de detección, no es tan eficaz como la del ácido nucleico. La prueba se realiza rápidamente.
La IgM es, en realidad, la forma de secreción del receptor de células B (BCR) en la superficie de los linfocitos B. Esta patrulla, preparada durante el desarrollo y la madurez del cuerpo humano, es equivalente a un recluta que aún no ha visto al enemigo. Tras reconocer el antígeno, las células B que las producen entran en el ganglio linfático, donde se entrenan con la ayuda de las células presentadoras de antígenos (CPA) (principalmente células dendríticas dendríticas) y los linfocitos T auxiliares, analizados para detectar hostilidad. El salto cualitativo del enemigo: las propias células B se han iluminado y evolucionado, lo que equivale a que un luchador de nivel 1 en Civilization se convierta en un luchador de nivel 6. El resultado de la evolución es la diferenciación de las células B en células plasmáticas, que pueden secretarse en grandes cantidades. Los anticuerpos, cuya afinidad es mucho mayor que la de la IgM, son la IgG. La IgG permanece en el cuerpo durante mucho tiempo, e incluso puede permanecer durante décadas. Sin embargo, la IgM solo aparece cuando el patógeno llega por primera vez y dura aproximadamente una semana. Por lo tanto, la IgM puede utilizarse para indicar si el organismo se encuentra en un estado de infección aguda.
Después de comprender las reglas de respuesta de anticuerpos del cuerpo, sabemos que si se pueden detectar anticuerpos IgM contra el nuevo coronavirus en la sangre humana, entonces se puede realizar un diagnóstico clínico.
El principio del papel de prueba de oro coloidal del método de captura de IgM es bien conocido.
El diseño del examen sigue siendo el mismo, pero todo es diferente en cada lugar.
La almohadilla de muestra se gotea con muestras de sangre (suero), que pueden contener anticuerpos IgM contra el nuevo coronavirus, y el antígeno marcado con oro reservado en la almohadilla de unión, en lugar del anticuerpo marcado con oro. Este antígeno es una proteína del nuevo coronavirus (expresada de forma recombinante in vitro). De esta manera, la IgM se unirá a este antígeno y transportará el oro coloidal. La posición de la línea de detección es el anticuerpo contra la IgM humana, de modo que si hay IgM en la muestra de sangre, una parte quedará atrapada por el anticuerpo en este lugar, pero si estas IgM no pueden reconocer el antígeno del coronavirus marcado con oro en la almohadilla de unión, entonces la prueba El hilo no desarrollará color. Así que este es el principio de la línea de detección.
Para la línea de control de calidad, se encuentra el anticuerpo preparado en laboratorio contra el antígeno marcado con oro en la almohadilla de unión. Por lo tanto, independientemente de si la muestra contiene IgM específica, al añadir el medio de flujo, el antígeno marcado con oro en la almohadilla de unión será capturado en este punto, es decir, la línea de control de calidad se coloreará. Este control de calidad es tan simple como el anterior: toma aproximadamente 15 minutos y se puede evaluar según la reproducción cromática de ambas líneas.
Después de la introducción del principio, la mayor ventaja del oro coloidal es que es rápido y conveniente.
Sin embargo, las deficiencias también son evidentes: el rendimiento es bajo y la precisión del papel de prueba depende en gran medida de la especificidad del anticuerpo. Si la calidad del anticuerpo es deficiente, es fácil que se produzcan reacciones cruzadas y se produzcan errores de diagnóstico. Además, el tiempo de producción de IgM es posterior al de replicación del virus, por lo que la ventana de detección no es tan buena como la de la detección de ácidos nucleicos.
